文献类型： 中文期刊

作者： 王小鹿 ¹ ; 李杰 ² ; 李贵阳 ² ; 唐磊 ¹ ; 杨慧超 ² ; 莫照兰 ¹ ;

作者机构： 1.中国海洋大学海洋生命学院

2.中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室

关键词： 鳗弧菌;rpoS;Hcp;T6SS;杀菌

期刊名称： 渔业科学进展

ISSN：

年卷期： 2021 年 006 期

页码： 125-134

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 溶血素共调节蛋白（Hcp）的合成和分泌是六型分泌系统（T6SS）行使功能的重要特征。RNA聚合酶的σ亚基RpoS参与调节细菌的生长和应激反应。为了探究RpoS对鳗弧菌（Vibrio anguillarum）T6SS的调控作用,本研究构建了 MHK3ΔrpoS突变株,检测了部分表型特征的变化;利用lacZ半乳糖苷酶报告基因检测了突变株hcpl和hcp2在转录水平的变化;进行Western blot并定量分析突变株Hcp在翻译水平的变化;并通过细菌拮抗实验检测了突变株杀菌能力的变化。结果显示,MHK3ΔrpoS突变株的生长情况、泳动性、明胶酶活性及酪蛋白酶活性与MHK3野生株相比无显著差异（P>0.05）,而平台早期的菌膜形成能力有显著上升（P<0.05）;在各生长时期,MHK3ΔrpoS的hcpl和hcp2在转录水平的表达量均较MHK3有显著上升（P<0.01）,最高时分别为MHK3的1.79倍和1.94倍;在翻译水平上,MHK3ΔrpoS在胞内和胞外Hcp的分泌均有显著升高（P<0.05）,最高时分别为MHK3的1.59倍和1.31倍;同时,MHK3ΔrpoS对大肠杆菌（Escherichia coli） E5的杀菌能力约为MHK3的1%。研究表明,rpoS对鳗弧菌MHK3株的生长情况、泳动性、明胶酶活性及酪蛋白酶活性均无显著调控作用,但对平台早期的菌膜形成能力具有一定的负调控作用,在转录和翻译水平上也负调控Hcp的表达。而在杀菌能力上,rpoS发挥一定的正调控作用。说明菌株的杀菌能力强弱并非直接与Hcp的表达和分泌量正相关。本研究为进一步阐明T6SS的调控机制及其介导的杀菌作用机制提供了新思路,并丰富了其理论基础。