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半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)c-Jun基因的克隆及免疫应答分析

文献类型: 中文期刊

作者: 于孟君 1 ; 孙璐明 1 ; 陈亚东 2 ; 陈学杰 2 ; 杨光 2 ; 刘洋 1 ; 仇雪梅 1 ; 沙珍霞 2 ;

作者机构: 1.大连海洋大学水产与生命学院

2.农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词: 半滑舌鳎;转录因子c-Jun基因克隆;表达分析;病原感染;免疫应答

期刊名称: 渔业科学进展

ISSN: 2095-9869

年卷期: 2017 年 38 卷 02 期

页码: 31-39

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)AP-1家族转录因子c-Jun基因(Jun proto-oncogene)及其在免疫应答中的作用尚无报道。本研究根据半滑舌鳎转录组数据库中预测的c-Jun序列,通过RACE技术和PCR扩增方法获得了半滑舌鳎c-Jun基因c DNA全长2093 bp,CDS区域共981 bp,编码326个氨基酸,5'UTR区域377 bp,3'UTR区域735 bp。SMART分析显示,C-JUN蛋白具有2个结构域:AP-1家族典型结构域Jun,以及高度保守的亮氨酸拉链结构域(BRLZ)。经蛋白多序列同源比对、系统进化树分析,发现半滑舌鳎c-Jun与虹鳟(Oncorhynchus mykiss)c-Jun亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析显示,c-Jun基因在半滑舌鳎不同组织中普遍表达,在卵巢中表达量最高。鳗弧菌(Vibrio anguillarum)人工感染半滑舌鳎后,c-Jun基因在肝脏、脾脏、头肾、小肠、鳃、血液中表达量都出现不同程度上调,其中,鳃中变化最明显:感染12 h后表达量达到0 h时的13.20倍。使用LPS、PGN、Poly I:C和WGP病原模拟物刺激半滑舌鳎外周血淋巴细胞,结果显示,WGP诱导c-Jun基因上调表达,而LPS与Poly I:C均下调基因表达。以上实验结果表明,c-Jun基因在半滑舌鳎的免疫防御中发挥重要作用。

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