文献类型： 中文期刊

作者： 梁慎 ¹ ; 常高正 ¹ ; 赵卫星 ¹ ; 杨丽荣 ² ; 孙虎 ² ; 李晓慧 ¹ ; 杨帆 ¹ ; 全鑫 ² ; 徐小利 ¹ ; 薛保国 ² ;

作者机构： 1.河南省农业科学院园艺研究所

2.河南省农业科学院植物保护研究所

关键词： 尖孢镰刀菌西瓜专化型;农杆菌;T-DNA插入转化;转化效率

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2012 年 41 卷 01 期

页码： 88-92

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)FO-11-06菌株为受体,采用农杆菌介导的遗传转化方法,实现了农杆菌AGL1(含pATMT1)介导的西瓜枯萎病菌的转化,并研究了转化介质和pH值对转化效率的影响。结果表明:在25℃下,采用乙酰丁香酮(AS)浓度为200μmol/L、农杆菌OD600=0.15、尖孢镰刀菌分生孢子含量为1×106个/mL、pH值为5.1～5.8时可实现T-DNA的插入转化。当转化体系pH值为5.3时,转化效率最高,达到每106个分生孢子产生553个转化子。不同共转化介质对转化效率影响明显,玻璃纸和硝酸纤维素滤膜转化效率较高,每106个分生孢子获得551个和549个转化子,显著高于滤纸。通过转化,获得尖孢镰刀菌西瓜专化型转化子1 989个,对生长速度、菌落颜色和产孢量等性状进行分析,发现有46个性状特异的突变体。研究结果为进一步研究尖孢镰刀菌西瓜专化型的生长发育、致病机制和相关基因的功能奠定了基础。