文献类型： 中文期刊

作者： 齐恩芳 ¹ ; 贾小霞 ¹ ; 刘石 ¹ ; 陈晓艳 ² ; 文国宏 ¹ ; 胡新元 ¹ ;

作者机构： 1.甘肃省农业科学院马铃薯研究所

2.哈密市伊州区种业研究开发中心

关键词： 马铃薯病毒;RNA干扰;转基因马铃薯;多病毒抗性

期刊名称： 植物保护学报

ISSN： 0577-7518

年卷期： 2019 年 46 卷 001 期

页码： 192-200

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得兼抗马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)和马铃薯潜隐花叶病毒(Potato virus S,PVS)4种病毒的转基因马铃薯新材料,分别以这4种病毒全长CP基因为模板,通过设计PCR引物和亚克隆获得4种病毒CP基因相对保守区段的基因片段,并将其拼接成融合基因,以载体pHANNIBAL和pBI121为基础,构建RNA干扰(RNA interference,RNAi)载体,利用农杆菌介导的转基因体系进行马铃薯遗传转化,并对获得的转基因马铃薯进行病毒抗性检测.结果 表明,所获得的融合基因片段RH1和RH2,酶切鉴定分别得到长度为1 200 bp的条带,与预期片段相符;构建了含pdk内含子和RH1、RH2融合基因的RNAi植物表达载体,经BamH I/SacI双酶切,获得长度约3 200 bp的片段,表明RNAi植物表达载体pBI121-pRH构建成功;转化易感病毒马铃薯品种陇薯11号,PCR检测和PCR-Southern杂交分析表明融合基因已整合到陇薯11号马铃薯基因组中;抗病性检测显示4株转基因马铃薯植株对4种病毒均免疫.表明利用RNAi可筛选出抗多种病毒的转基因马铃薯新种质.