文献类型： 中文期刊

作者： 牟芮 ¹ ; 刘尚武 ² ; 姜丽丽 ³ ; 万书明 ² ; 王绍鹏 ⁴ ;

作者机构： 1.黑龙江八一农垦大学农学院黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所东北农业大学农学院

2.黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所

3.东北农业大学

4.黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所黑龙江省马铃薯工程技术研究中心

关键词： 马铃薯;基因沉默;联合多抗;马铃薯病毒;amiRNA;遗传转化

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2017 年 04 期

页码： 1320-1326

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 马铃薯病毒及类病毒病害严重影响了中国马铃薯的生产。为了培育抗病毒及类病毒的马铃薯新材料,本研究采用人工miRNA(artificial microRNA,amiRNA)策略,以马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)与马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)编码沉默抑制子P25蛋白和HC-pro蛋白的基因为靶标,利用5'RACE技术对P25基因、HC-Pro基因潜在的剪切热点进行预测。再采用overlapping PCR技术,以拟南芥mi R159a前体为骨架,设计特异性引物,构建分别靶向P25和HC-Pro基因的amiRNA表达载体。同时构建靶向马铃薯内源基因Virp1的amiRNA表达载体,将构建完成的三个amiRNA表达载体串联获得amiRNAs三联体,分别转入根癌农杆菌菌株EHA105,并用农杆菌介导法转化马铃薯品种克新13。经PCR鉴定,结果表明,目的基因片段已成功转入马铃薯中。