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传染性法氏囊病病毒VP2与C3d串联基因重组表达质粒的构建及其免疫功能研究

文献类型: 中文期刊

作者: 马金荣 1 ; 欧阳伟 1 ; 王永山 1 ; 吴晓悠 1 ; 朱向东 1 ; 张海彬 2 ; 范红结 2 ; 王忠灿 3 ; 唐雨德 3 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心

2.南京农业大学动物医学院

3.南京军区军事医学研究所南京军区疾病预防控制中心

关键词: 传染性法氏囊病病毒;VP2基因;鸡补体C3d;分子免疫佐剂;基因免疫

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2012 年 34 卷 06 期

页码: 471-475

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,本研究根据已发表的鸡源补体C3d序列,设计并合成在5'端添加编码连接肽(Gly4Ser)2序列的C3d基因。用同尾酶BglⅡ和BamHⅠ构建含有3拷贝C3d与VP2基因融合的重组表达质粒pcDNA-VP2-3C3d。用脂质体法转染BHK21细胞,48 h后,westernblot分析表明,表达的重组蛋白为162 ku;间接免疫荧光试验检测转染细胞中具有特异性荧光。用pcDNA-VP2-3C3d与前期构建的pcDNA-VP2分别免疫2周龄SPF鸡,二免14 d后,间接ELISA法检测IBDV抗体效价,pcDNA-VP2-3C3d组抗体水平显著高于pcDNA-VP2组;MTT法检测鸡脾淋巴细胞增殖活性,pcDNA-VP2-3C3d组免疫诱导的特异性淋巴细胞增殖活性显著高于pcDNA-VP2组(p<0.05)。本研究表明C3d可以增强VP2基因免疫诱导的IBDV特异性体液和细胞免疫应答。

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