文献类型： 中文期刊

作者： 余波 ¹ ; 姜玲玲 ¹ ; 李婷 ¹ ; 周景瑞 ¹ ; 许浩翔 ¹ ; 冉江 ¹ ; 罗文菊 ¹ ; 刘镜 ¹ ;

作者机构： 1.贵州省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 牛;病毒性腹泻/黏膜病病毒;轮状病毒;冠状病毒;三重RT-PCR

期刊名称： 中国畜禽种业

ISSN： 1673-4556

年卷期： 2023 年 19 卷 004 期

页码： 96-100

摘要： 为建立快速同步检测牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒与牛冠状病毒的多重RT-PCR检测方法并应用于临床检测.根据GenBank中三种病毒参考毒株的基因序列,设计3对特异性引物.利用构建的三种病毒的标准质粒进行三种病毒的三重RT-PCR方法,进行特异性、敏感性和重复性检验,并进行临床样品检测.特异性结果显示,建立的牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的三重RT-PCR方法可特异性扩增出阳性标准质粒的基因片段,对牛源沙门氏菌、大肠杆菌、牛巴氏杆菌、牛支原体无扩增;敏感性结果显示,对牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒质粒核酸最低检测浓度分别为250、250和25ng/mL.重复性结果显示,能扩增出一致的目的基因条带.临床样品结果显示,三重RT-PCR方法和单一RT-PCR符合率100%.可见,建立牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的三重RT-PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,可进行临床检测.