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日本鳗鲡Ⅰ型Cathelicidin基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 张东玲 1 ; 喻达辉 2 ;

作者机构： 1.集美大学水产学院鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心

2.中国水产科学研究院南海水产研究所

关键词： 日本鳗鲡;Cathelicidin;抗菌肽;RACE-PCR

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2015 年 31 卷 07 期

页码： 124-131

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： Cathelicidin是目前发现的一个最大抗菌肽家族,具有多重生物学功能。旨在探索和利用鱼类Cathelicidin抗菌机制和潜在的生物学功能。应用RACE-PCR技术获得日本鳗鲡I型Cathelicidin(Aj Cath I)基因的c DNA全长序列。Aj Cath I的c DNA全长为842 bp,开放阅读框为570 bp,编码189个氨基酸。氨基酸序列分析表明,Aj Cath I靠近C端有4个保守的半胱氨酸序列,抗菌成熟肽与香鱼(Plecoglossus altivelis)抗菌成熟肽相似性最高,同源性为65.57%。进化分析表明,Aj Cath I与其它鱼类亲缘关系较近,处于同一个分支上。将Aj Cath I基因克隆至p ET-28a载体,转化Escherichia coli BL21(DE3)宿主菌进行表达。结果表明,Aj Cath I以包涵体形式表达,经鎳柱纯化、Western blot验证和透析复性,获得高纯度的重组蛋白。

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