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草鱼TRIM32基因克隆表达及功能研究

文献类型: 中文期刊

作者: 贾路路 1 ; 曾令兵 2 ; 王方 2 ; 彭俊杰 2 ; 王业大 2 ; 周勇 2 ; 刘学芹 3 ;

作者机构: 1.华中农业大学水产学院水生动物医学系;中国水产科学研究院长江水产研究所;淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心;池塘健康养殖湖北省工程实验室

2.;华中农业大学水产学院水生动物医学系;中国水产科学研究院长江水产研究所;淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心;池塘健康养殖湖北省工程实验室

3.;华中农业大学水产学院水生动物医学系;中国水产科学研究院长江水产研究所;淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心;池塘健康养殖湖北省工程实验室;

关键词: TRIM32;克隆;真核表达;NF-κB

期刊名称: 水生生物学报

ISSN: 1000-3207

年卷期: 2017 年 04 期

页码: 741-747

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: TRIM(Tripartite-motif protein)家族是机体先天性免疫的重要成员,参与细胞增殖分化、细胞凋亡、肿瘤抑制、抗病毒等过程。为了进一步探究TRIM蛋白在鱼类免疫中的作用,实验利用PCR方法克隆了草鱼TRIM32基因的编码区全长,共1980 bp,编码660个氨基酸。草鱼TRIM32具有TRIM家族典型的3个结构域,与斑马鱼TRIM32的核苷酸序列同源性较高,遗传进化分析也聚为一支。间接免疫荧光、Western-blotting检测结果显示草鱼TRIM32在EPC细胞中成功表达,主要以点状分布在细胞质中,细胞核中表达量较少;组织分布分析表明TRIM32在被检测的11个组织中均有表达,其中在头肾组织中的表达量明显高于其他组织;不同胚胎发育时期的表达分析进一步表明,TRIM32在受精卵时期、卵裂期和囊胚期的表达量显著高于其他时期(P<0.05),随后表达量下降,直到出膜后表达量再次显著性升高。此外,双荧光素酶检测系统显示TRIM32能够激活NF-κB信号通路,诱导下游的炎症反应。结果显示,草鱼TRIM32广泛分布于鱼体内,并参与机体的天然免疫反应,对于抵抗病原体的入侵具有重要作用。

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