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猪链球菌2型转录调控因子Rex原核表达及体外结合活性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 王勇 1 ; 祝昊丹 2 ; 何孔旺 2 ; 范红结 3 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室;南京农业大学动物医学院;江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地

2.;江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室;南京农业大学动物医学院;江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地

3.;江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室;南京农业大学动物医学院;江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地;

关键词： 猪链球菌;Rex;调控因子

期刊名称： 中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2017 年 08 期

页码： 680-684

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的克隆猪链球菌2型转录调控因子Rex的编码基因进行原核表达和纯化,对其进行生物信息学分析和体外结合活性测定。方法 PCR扩增猪链球菌2型强毒株SS2-1的Rex基因编码区,将其克隆入pET28a质粒中,再将pET28aRex重组质粒转入大肠杆菌表达菌BL21(DE3)中,重组菌株经IPTG诱导后能表达出猪链球菌Rex蛋白;通过体外凝胶迁移实验(EMSA)对Rex蛋白与DNA的结合活性进行分析。结果成功地原核表达并纯化了Rex重组蛋白。Rex蛋白与自身启动子Prex特异性结合,高浓度的NADH抑制两者的结合活性,而NAD~+对结合没有影响。结论通过体外结合试验发现Rex是通过响应NADH/NAD~+平衡来调控自身基因的表达。

  • 相关文献

[1]猪链球菌2型调控因子Rex缺失株的构建及其致病性鉴定. 王勇,祝昊丹,何孔旺,范红结. 2017

[2]稻田土壤真菌群落多样性和组成对麦秸还田的响应. 王宁,于建光,常志州,黄红英,顾克军,张振华. 2017

[3]江苏省某猪场猪链球菌分离鉴定及致病特性分析. 周俊明,王丹丹,倪艳秀,祝昊丹,孙珂,李彬,俞正玉,吕立新,何孔旺. 2020

[4]猪链球菌、胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌多重PCR检测方法的建立和应用. 孙学飞,倪艳秀,茅爱华,何孔旺. 2016

[5]猪链球菌2型的致病特性与毒力因子. 何孔旺,陆承平. 2000

[6]次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)基因在猪链球菌不同血清型中的分布. 倪艳秀,周俊明,张雪寒,温立斌,吕立新,郭容利,俞正玉,茅爱华,何孔旺,陆承平. 2008

[7]猪链球菌2型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)重组蛋白的酶活性和免疫原性检测. 张雪寒,何孔旺,周俊明,倪艳秀,俞正玉,吕立新. 2009

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