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非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 余斌 1 ; 徐丽华 1 ; 李军星 1 ; 苏菲 1 ; 叶十一 1 ; 袁秀芳 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 非洲猪瘟病毒;荧光定量PCR;B646L;检测

期刊名称： 浙江农业科学

ISSN： 0528-9017

年卷期： 2023 年 64 卷 004 期

页码： 964-967

摘要： 为建立一种快捷高效的非洲猪瘟病毒(ASFV)的检测方法,本研究根据GenBank中登录的ASFV B646L基因保守区序列设计引物和探针,通过优化PCR反应体系和反应条件,建立了非洲猪瘟Taqman荧光定量(ASFV-qPCR)检测方法,验证其特异性、灵敏性和重复性.结果显示:本研究所建立的检测方法特异性强,与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒(PCV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)均无交叉反应;灵敏度高,能检出10拷贝阳性质粒DNA;重复性好,组内和组间重复试验变异系数均小于1.5%.本研究为非洲猪瘟快速诊断提供了有力技术支撑,为进一步开发ASFV多重荧光PCR检测技术奠定了坚实的基础.

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