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马铃薯卷叶病毒分离株外壳蛋白基因和17k蛋白基因的克隆及序列分析

文献类型： 中文期刊

作者： 吴志明 1 ; 朱水芳 2 ; 田文会 3 ; 张成良 2 ;

作者机构： 1.河北省农林科学院植物转基因中心

2.农业部植物检疫实验所

3.河北农业大学植保学院

关键词： 马铃薯卷叶病毒;外壳蛋白基因;克隆

期刊名称： 河北农业大学学报

ISSN： 1000-1573

年卷期： 2002 年 25 卷 04 期

页码： 69-73+79

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从典型的马铃薯卷叶病毒病株中直接提取出植物总RNA ,根据PLRV外壳蛋白基因序列 ,设计合成了一对寡核苷酸引物 ,经RT -PCR法扩增出全长的cDNA片段 ,将其克隆到质粒pGEM - 3Zf (+)上 ,并进行了序列分析。结果表明 ,克隆的cDNA片段由 6 2 7个核苷酸组成 ,编码 2 0 8个氨基酸组成的理论分子量为2 3k的蛋白 ,与PLRV外壳蛋白的大小一致 ;此外克隆片段还含有一个不同于外壳蛋白基因的阅读框架 ,该框架由 46 5个核苷酸组成 ,编码 15 5个氨基酸组成的理论分子量为 17k的蛋白 ,与PLRV的 17k蛋白大小一致。与国外报道的几个株系相比 ,PLRV分离物的外壳蛋白基因及 17k蛋白基因的核苷酸同源率分别高达97 5 %～ 99 7%和 96 5 %～ 99 6 % ,由此推测的氨基酸同源率高达 97 6 %～ 99 5 %和 96 1%～ 99 4% ,说明所克隆的PLRV外壳蛋白基因和 17k蛋白基因具有高度的保守性 ,本研究克隆了PLRV分离物外壳蛋白和17k蛋白基因的序列 ,为进一步进行抗PLRV基因工程研究奠定基础

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