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土壤中落叶型棉花黄萎病菌的分子检测方法

文献类型： 中文期刊

作者： 简桂良 1 ; 林玲 2 ; 邓晟 2 ; 周益军 2 ;

作者机构： 1.中国农业科学院植物保护研究所

2.江苏省农业科学院植物保护研究所

关键词： 落叶型棉花黄萎病菌;巢式PCR;分子检测

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2011 年 27 卷 05 期

页码： 75-80

收录情况： 北大核心

摘要： 为了建立快速、准确检测土壤中落叶型棉花黄萎病菌的方法,本试验将提取自落叶型棉花黄萎病菌菌株V991的DNA稀释成不同浓度,同时提取在灭菌土中接入不同数量的V991孢子后制成的人工病土中的DNA,并采用五点取样法提取自然土样中的DNA,选用落叶型黄萎病菌的特异性巢式PCR引物,对上述DNA样品进行检测。结果显示:采用巢式PCR法可检测到落叶型棉花黄萎病菌菌株V991的DNA浓度为1×10-4 mg/L,同时每克人工病土中含有10个V991孢子也可被检测到,该方法灵敏性比常规PCR法提高2～5个数量级。用该方法对所取自然土样进行检测,均可检测到落叶型棉花黄萎病菌的存在。

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