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朝鲜碱茅ISSR-PCR反应体系的建立与优化

文献类型: 中文期刊

作者: 任伟 1 ; 徐安凯 1 ; 徐博 2 ; 于洪柱 1 ; 王志锋 1 ;

作者机构: 1.吉林省农业科学院

2.中国农业科学院草原研究所

关键词: 朝鲜碱茅;ISSR;单因子试验;体系优化

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2012 年 0 卷 06 期

页码: 59-65

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为进一步开展朝鲜碱茅种质资源遗传多样性的研究,以野生朝鲜碱茅(Puccinellia chinampoensis)为材料,通过单因子试验对ISSR-PCR反应进行优化。确立最佳的PCR反应体系:在20μL反应体系中,含有模板DNA 40 ng,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.8μmol/L,TaqDNA聚合酶1 U,MgCl22.5 mmol/L和10×PCR Buffer(Mg2+free)2μL。此外,还筛选到10条扩增稳定、条带丰富的候选引物,并确定了各自的最佳退火温度。

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