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大麻哈鱼SRAP反应体系正交设计及优化

文献类型： 中文期刊

作者： 张慧 1 ; 孙中武 1 ; 刘伟 2 ; 尹洪滨 2 ;

作者机构： 1.东北林业大学生命科学学院

2.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所

关键词： 大麻哈鱼;SRAP;正交设计;单因子试验

期刊名称： 水产学杂志

ISSN： 1005-3832

年卷期： 2010 年 23 卷 02 期

页码： 10-14

摘要： 以大麻哈鱼基因组DNA为模板,利用相关序列多态性(SRAP)技术以及L25(56)正交试验和单因子试验方法,分析了不同浓度的TaqDNA聚合酶、引物、dNTPs、Mg2+、DNA模板对扩增结果的影响,最终确立的PCR最佳反应体系为15μl,该体系含有1×PCRbuffer,TaqDNA聚合酶0.75U,引物浓度0.3μmol/L,dNTPs浓度0.3mmol/L,Mg2+浓度2.5mmol/L,DNA模板100ng。利用此优化反应体系,获得了清晰、稳定、多态性高的DNA谱带。

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