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羊蹄GAPDH基因的克隆及序列分析

文献类型： 中文期刊

作者： 任聪 1 ; 黄五星 2 ; 张翔 3 ; 邵惠芳 2 ; 许自成 2 ;

作者机构： 1.河南牧业经济学院

2.河南农业大学烟草学院

3.河南省农业科学院植物营养与资源环境研究所

关键词： 羊蹄;GAPDH基因;克隆

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2015 年 44 卷 02 期

页码： 115-118

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为利用实时荧光定量PCR技术研究中草药羊蹄有效化学成分合成相关基因表达情况,采用针对多糖、多酚植物样品的总RNA提取试剂提取高质量的羊蹄总RNA,随后运用反转录PCR方法克隆了羊蹄甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因的部分c DNA序列,并以该序列为模板设计引物,采用实时荧光定量PCR验证其作为内源参照基因的可靠性。结果表明:获得的核酸序列长564 bp,编码188个氨基酸;推导的氨基酸序列与西伯利亚蓼、拟南芥、小麦GAPDH基因编码的氨基酸序列同源性分别为92%、90%和89%;扩增曲线和熔解曲线显示设计的引物可应用于实时荧光定量PCR扩增。羊蹄GAPDH基因的克隆为利用实时荧光定量PCR技术研究目的基因表达情况奠定了基础。

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