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玉米双低频酶cDNA-AFLP体系的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 宋欣 1 ; 杨文鹏 2 ; 赵德刚 1 ;

作者机构： 1.贵州省农业生物工程重点实验室/贵州大学

2.贵州省旱粮研究所

关键词： 玉米;RNA提取;cDNA-AFLP

期刊名称： 玉米科学

ISSN： 1005-0906

年卷期： 2008 年 16 卷 02 期

页码： 12-15+21

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以玉米自交系QCL1094为材料,用RNAisoReagent、柱式试剂盒法、异硫氰酸胍法等3种方法提取苗期叶片总RNA,用PrimeScriptTM1stStrandcDNASynthesisKit反转录获得第一链cDNA,用RNaseH、E.coliDNA聚合酶I和E.coliDNA连接酶合成第二链cDNA,用T4DNA聚合酶进行末端平滑得到双链cDNA,最后,用双低频酶EcoRI和PstI酶切双链cDNA,用T4DNA连接酶连接接头,用引物EA00和P00进行预扩增,用引物EA01和P01进行选择性扩增。经1%琼脂糖凝胶和6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,结果表明,RNA提取及cDNA-AFLP预扩增和选择性扩增的效果良好。

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