文献类型： 中文期刊

作者： 陈松 ¹ ; 张杰夫 ¹ ; 陈峰 ¹ ; 陈新军 ¹ ; 龙卫华 ¹ ; 浦惠明 ¹ ; 戚存扣 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院经济作物研究所

关键词： 甘蓝型油菜;fad2基因;ihpRNA表达载体

期刊名称： 中国油料作物学报

ISSN： 1007-9084

年卷期： 2006 年 28 卷 03 期

页码： 251-256

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在通过转基因途径诱导油菜种子中fad2基因发生转录后基因沉默,本文构建了fad2基因的ihpRNA植物表达载体。通过PCR扩增分离到甘蓝型油菜种子特异性表达的Nap in启动子序列(1147bp)以及油酸脱饱和酶基因(fad2)的一个537bp的片段,并将它们分别克隆到pGEM-T easy载体中。利用中间载体pHurrican构建fad2基因的反向重复框。将fad2基因片段以正向的方式连接在一个可剪切的内含子的5’末端,而以反向的方式连接到该内含子的3’末端;然后将Nap in启动子序列连接到该反向重复框的5’端,而在其3’端接有一个nos终止子序列;最后将fad2基因的反向重复表达框分两步克隆到植物双元载体pCAMB IA2300的pUC18多克隆位点,构建具有种子特异性表达的fad2基因的ihpRNA表达载体pCNFIRnos。限制性内切酶酶切对载体作了鉴定分析。