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拟南芥热激因子cDNA的克隆及转化烟草研究

文献类型： 中文期刊

作者： 熊爱生 1 ; 彭日荷 1 ; 李贤 1 ; 范惠琴 1 ; 姚泉洪 1 ;

作者机构： 1.上海市农业遗传育种重点实验室

关键词： 拟南芥;热激因子基因;克隆;转基因烟草

期刊名称： 上海农业学报

ISSN： 1000-3924

年卷期： 2003 年 19 卷 01 期

页码： 7-11

收录情况： CSCD

摘要： 拟南芥热激因子是一重要的耐热基因。从拟南芥幼苗中提取总RNA ,根据报道设计引物 ,利用RT PCR的方法扩增出大约 1.4kb的拟南芥热激因子基因Athsfc。将其克隆入pBluescriptSK载体的XbaI和SacI位点 ,测序结果显示核苷酸序列与国外H櫣ｂｅｌ(1994)报道的Athsf1基因间 99.8%同源 ,只有 3个核苷酸不同。序列分析显示 ,编码相同的氨基酸。将该基因构建入含内含子Km筛选标记的植物双元表达载体pYP12 0 3E中 ,构成了拟南芥热激因子基因 Athsfc植物表达载体pYP12 0 3E(Athsfc)。利用根癌农杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)对烟草进行Athsfc基因的转化 ,获得了GUS染色显示阳性的烟草转基因植株 ,经过PCR和PCRsouthernblot分子检测证明了转基因植株为阳性

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