文献类型: 中文期刊
作者: 赵坤 1 ; 郑玉妹 1 ; 赵德明 2 ; 赵朴 1 ; 赵恒章 1 ; 常新耀 1 ; 王选年 1 ;
作者机构: 1.河南科技学院动物科学学院
2.中国农业大学动物医学院
关键词: 鸡传染性法氏囊病病毒;VP3蛋白;原核表达;重叠多肽;B细胞抗原表位
期刊名称: 中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2009 年 31 卷 12 期
页码: 958-962
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为鉴定鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP3蛋白中的B细胞抗原表位,本研究将IBDV的VP3基因亚克隆于pET-28a中,构建了表达重组质粒pETVP3,经IPTG诱导在E. coli BL21(DE3)中表达了重组蛋白(rVP3)。Western blot鉴定表明,rVP3能被IBDV抗血清特异性识别。同时,根据IBDVVP3的氨基酸序列,合成覆盖VP3全序列的重叠多肽,并与载体蛋白BSA藕联制备多肽人工结合抗原。Peptide-ELISA和Dot-ELISA检测结果表明VP3中有2个线性表位可以被已制备的单克隆抗体(MAb)识别,即728PRDWDRLPYLNL739和982PKPKPKPNAPTQ993;Dot-ELISA结果显示,在VP3中还存在另外4个线性多克隆抗体识别位点:818LANAPQAGSKSQRA831,851QREKD TRISKKMETMGIYFATP872,876ALNGHRGPSPGQLKYWQNTREI897和961QMKDLLLTAMEMK973。这些抗原表位的鉴定为开发IBD表位疫苗奠定了基础。
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