文献类型： 中文期刊

作者： 缪倩 ¹ ; 季英华 ¹ ; 任春梅 ¹ ; 魏利辉 ¹ ; 周益军 ¹ ; 程兆榜 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院植物保护研究所

关键词： 小麦黄花叶病毒;中国小麦花叶病毒;禾谷多粘菌;复合PCR

期刊名称： 麦类作物学报

ISSN： 1009-1041

年卷期： 2013 年 33 卷 03 期

页码： 193-197

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 针对小麦黄花叶病毒(WYMV)和中国小麦花叶病毒(CWMV)在症状、传播途径、发生规律等方面高度相似、难以用常规手段鉴定的问题,根据两种病毒基因序列的异同点设计了三条引物CWWY-R2、CW1-F2和WY1-F2,以植物总RNA为模板、CWWY-R2为引物反转录合成cDNA。通过优化建立了一种同步检测两种病毒的反应体系:cDNA1.6μL,引物(10μmol.L-1)各0.4μL,10×PCR Buffer(不含Mg2+)2μL,dNTPs(10mmol.L-1 each)0.4μL,Taq DNA聚合酶(5U.μL-1)0.8μL,MgCl2(25mmol.L-1)0.8μL,ddH2O 13.2μL,合计20μL;PCR反应条件:94℃预变性5min,94℃50s,50℃50s,72℃90s,共30个循环,72℃延伸10min。WYMV和CWMV的PCR扩增预期目的片段分别为508和918bp。利用该方法对江苏高邮、扬州和大丰的样本进行检测,它们分别为WYMV、WYMV、CWMV单一侵染,证明该方法准确性较高,可用于两种病害同步检测。