文献类型: 中文期刊
作者: 黄萍 1 ; 沈孝善 1 ;
作者机构: 1.贵州省农业科学院生物技术研究所
关键词: 绿菇;分生孢子;原生质体;再生;渗透压稳定剂;二氯化钙
期刊名称: 西南农业学报
ISSN: 1001-4829
年卷期: 2001 年 14 卷 01 期
页码: 91-95
收录情况: CSCD
摘要: 收集 30℃下 ,暗培养 36~ 4 8hr的菌体 ,放入酶液中并把菌丝分散 ,经过 3~ 8hr的酶解 ,菌体产生的分生孢子 95%以上成为原生质体。经过滤、离心纯化 ,原生质体的产量在 0 1×10 6~ 1 75× 10 7个 /g (鲜重 )。以液体浅层培养 ,在 30℃下培养离心纯化的原生质体 2~ 7hr ,原生质体形成萌发管 ,4 8hr形成肉眼可见的菌落。再生率随分离原生质体的条件变化很大 ,在3 0 %~ 6 7 7%。在 15℃下培养也能形成再生菌落。培养菌体的时间、酶浓度、酶解时间、酶解温度、震荡与否影响原生质体的形成和再生。以CaCl2 高渗缓冲液酶解 7~ 2 4hr ,原生质体的再生率为 4 5 7%~ 6 7 6 % ,是使用其他高渗缓冲液酶解 3~ 5hr的 2~ 6倍
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