文献类型: 中文期刊
作者: 司徒俊键 1 ; 江立群 1 ; 邵毅 1 ; 孔广辉 1 ; 习平根 1 ; 姜子德 1 ;
作者机构: 1.华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室;广东省农业科学院水稻研究所;岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心
关键词: 荔枝霜疫霉;基因编辑;CRISPR/Cas9;RXLR
期刊名称: 菌物研究
ISSN: 1672-3538
年卷期: 2020 年 003 期
页码: 181-188
摘要: 参考大豆疫霉的CRISPR/Cas9基因组编辑技术体系,针对荔枝霜疫霉RXLR效应蛋白编码基因Pl Avh133设计了20 bp的sgRNA靶向序列,结合同源替换的方式对该基因进行敲除.利用聚乙二醇(PEG)介导的原生质体转化,共获得了58个具有G418抗性的转化子,通过PCR和测序分析证明其中5个转化子的Pl Avh133基因被敲除,敲除效率约为8.6%.荧光定量PCR分析证实Pl Avh133敲除突变体中该基因不表达.本研究结果为荔枝霜疫霉的基因功能研究提供了重要的技术基础.
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