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大白菜耐旱相关基因BpNFYA5的克隆及功能初步分析

文献类型: 中文期刊

作者: 黄人卉 1 ; 王桂香 2 ; 刘凡 3 ;

作者机构: 1.首都师范大学生命科学学院

2.北京市农林科学院蔬菜研究中心

3.农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室

关键词: 大白菜;拟南芥;BpNFYA5;基因;抗旱性;功能

期刊名称: 园艺学报

ISSN: 0513-353X

年卷期: 2012 年 39 卷 08 期

页码: 1501-1510

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以拟南芥(Arabidopsis thaliana)NFYA5基因(GenBank登录号:At1g54160)的序列为基准,通过比对获得芸薹属大白菜[Brassi cacampestrisL.ssp.pekinensis(Lour.)Makino]同源EST序列;采用电子克隆的方法从大白菜中克隆到相关基因全长序列,命名为BpNFYA5。该基因包含3个内含子,其推导蛋白与拟南芥NFYA5CCAAT-box结合域相似性达92.6%。对大白菜进行干旱胁迫,发现BpNFYA5显著上调表达。构建了植物过表达载体pBIn-NFYA5和RNA干扰载体pFGC-NFYA5,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导浸花法转化拟南芥。经除草剂、潮霉素筛选及PCR鉴定获得转基因植株。采用干旱和10%PEG6000模拟亏水胁迫,对转基因材料的T2代进行了耐旱性鉴定。结果显示:过表达植株(OL)较野生型植株(WT)和干扰表达植株(Ri)叶绿素含量高;渗透胁迫下OL植株脯氨酸含量迅速积累,积累量显著高于WT和Ri植株;控水干旱2周OL株系较WT及Ri材料具有更好的干旱耐受性;OL株系离体叶片的失水速率较小,叶片有效水分利用率较WT和Ri高。结果表明所克隆的基因BpNFYA5在亏水胁迫调控中具有抗旱作用。

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