文献类型： 中文期刊

作者： 周勇 ¹ ; 曾令兵 ¹ ; 范玉顶 ¹ ; 罗晓松 ¹ ; 徐进 ¹ ; 肖艺 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院

关键词： 草鱼出血病;呼肠孤病毒;VP6基因;LTB基因;植物表达载体

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2011 年 18 卷 01 期

页码： 1-7

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus,GCRV)VP6蛋白的全基因序列(AF403394)和大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的基因序列(M17874),设计并合成特异性引物,从感染草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肾细胞(CIK)中提取病毒核酸作为模板,进行RT-PCR扩增,得到约1.3 kb的GCRV VP6基因读码框片段,同时提取大肠杆菌(Escherichia coli)H44815全基因组作为模板,进行PCR扩增得到约370 bp的LTB基因读码框片段。将获得的2个目的片段分别克隆到pCR2.1载体上,经酶切、PCR扩增检测和序列测定确认后,将其克隆到携带绿色荧光蛋白标记的植物表达载体pCAMBIA1302上,成功构建了可将草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白、大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)、绿色荧光蛋白(GFP)融合表达的植物载体pCAMBIA 1302-LTB-VP6。本研究旨为草鱼出血病可饲化转基因植物疫苗研制奠定基础。