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大黄鱼肿大细胞病毒不同毒株的细胞培养及主要衣壳蛋白基因比较

文献类型: 中文期刊

作者: 杨西西 1 ; 池洪树 1 ; 郑在予 1 ; 刘晓东 1 ; 罗潘潘 1 ; 许斌福 1 ; 陈秀霞 1 ; 龚晖 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院生物技术研究所;福建农林大学动物科学学院;中山大学生命科学学院

关键词: 大黄鱼;肿大细胞病毒;细胞培养;主要衣壳蛋白

期刊名称: 水产学报

ISSN: 1000-0615

年卷期: 2023 年 47 卷 009 期

页码: 145-154

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立大黄鱼肿大细胞病毒的培养方法,明确其分类地位,用肿大细胞病毒检测呈阳性的大黄鱼幼鱼病料(FD201807 和SA201808)肾组织匀浆液感染鳜仔鱼细胞系(man-darin fish fry cell line-1,MFF-1)并连续传代,从病料组织匀浆液和细胞冻融液中提取病毒DNA,克隆病毒主要衣壳蛋白基因(mcp),测序后与NCBI GenBank中的虹彩病毒科肿大细胞病毒属病毒mcp以及 2018-2020 年所检出的 15 株大黄鱼肿大细胞病毒mcp进行比对分析.结果显示,病毒传至第 4 代才可引起MFF-1 细胞病变,细胞病变的主要特征为细胞脱壁、变圆、折光度增强;感染时间越长脱壁细胞越多,同时培养液中的颗粒增加;透射电镜下可见感染细胞的细胞质散在大小为 130~150 nm的六边形病毒粒子和空壳.感染细胞的病变周期随传代代次的增加而缩短,第 15 代次的FD201807 株感染细胞 80%细胞病变的时间为 3d,第 15 代次的SA201808 株感染细胞 80%细胞病变的时间为 7~8 d.mcp序列比对和聚类分析发现,SA201808 株与FD201807 株的mcp序列存在 21 个碱基差异,二者的 mcp序列分别与大黄鱼虹彩病毒(large yellow croaker iridovirus,LYCIV)LYCIV-Zhoushan(GenBank:MW139932.1)和花鲈虹彩病毒(Lateolabrax maculatus iridovirus,LMIV)(GenBank:MH577517.1)相近.15 株从大黄鱼病料检出的肿大细胞病毒中,12 株的mcp序列与SA201808 株聚类;3 株与FD201807 聚类.本研究利用MFF-1 细胞系分离培养了大黄鱼肿大细胞病毒,揭示了大黄鱼肿大细胞病毒存在差异,为更好地了解大黄鱼肿大细胞病毒提供了数据参考.

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