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橡胶树延伸因子cDNA及其5′端启动子区域序列的分离与分析

文献类型： 中文期刊

作者： 邓晓东 1 ; 费小雯 2 ; 黄俊生 1 ; 郑学勤 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室

2.中山大学生命科学学院生物工程中心

关键词： 橡胶树;橡胶延伸因子;启动子;Northernblot

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2002 年 28 卷 04 期

页码： 528-532

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 橡胶延伸因子 REF(Rubber Elongation Factor)是橡胶生物合成中最重要的酶之一 ,是胶乳中主要的蛋白质。作者利用已发表的 REF c DNA序列设计并合成引物。通过提取胶乳总 RNA用 RT法合成 c DNA后 ,通过 PCR技术扩增并克隆了 REF c DNA序列。序列测定结果表明 ,所克隆的 REF c DNA编码区序列全长 4 14个碱基 ,编码 138个氨基酸 ,3′端非编码区长 112 bp。与 Goyvaerts E等人发表的序列比较 :REF c DNA编码区序列同源率为 10 0 % ,3′端非编码区有 2 bp的差异 ,同源率为 98%。在此基础上 ,通过步移法分离 5′端启动子区域 2 6 0 bp的序列 ,其中 ,含典型的TATA盒和 CAAT盒。为证实该基因为乳管特异表达 ,我们通过 Northern blot对橡胶延伸因子基因在胶乳和叶片中的表达做分析。初步结果表明 ,橡胶延伸因子基因主要在胶乳中表达。

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