文献类型： 中文期刊

作者： 李文良 ¹ ; 毛立 ² ; 邓加武 ² ; 郝飞 ² ; 李基棕 ² ; 杨蕾蕾 ² ; 张纹纹 ² ; 江杰元 ³ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

2.;江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

3.;江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室;

关键词： Viperin;猪瘟病毒;抗病毒;共定位;相互作用

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2018 年 01 期

页码： 139-146

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： Viperin是一种抗病毒蛋白,具有广谱的抗病毒功能。为了研究猪源抗病毒蛋白Viperin对猪瘟病毒(CSFV)的抗病毒作用及机制,通过构建细胞系过表达或通过siRNA转染抑制Viperin表达,采用荧光定量RTPCR和病毒滴度测定检测CSFV增殖水平的变化;检测培养上清和细胞中病毒含量的变化趋势,评价其对病毒释放的影响;进而通过共聚焦试验和免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)试验检测Viperin与病毒E2蛋白的共定位与相互作用。与对照细胞相比,过表达Viperin蛋白可以显著抑制CSFV在PK-15细胞上的复制,在感染后24、48、72h,病毒基因水平和病毒滴度分别下降68.75%、83.61%、77.27%和68.75%、87.5%、80.39%。通过RNA干扰技术抑制Viperin在PK-Vi细胞中的表达后CSFV复制显著恢复(仍低于对照组)。培养上清和细胞中病毒含量均同等程度受到抑制,表明Viperin表达对病毒的释放没有影响。共聚焦试验证明Viperin蛋白与E2蛋白在细胞内存在共定位现象。免疫共沉淀试验证明Viperin蛋白与E2蛋白存在相互作用。该研究证实Viperin具有抗CSFV作用,该作用可能是通过与病毒E2蛋白相互作用实现的,这为CSFV与宿主免疫反应相互作用研究提供了理论基础。