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甘蓝型油菜CRABS CLAW基因克隆及其RNA干扰载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 周晓婴 1 ; 付三雄 1 ; 陈松 1 ; 张超 2 ; 戚存扣 1 ;

作者机构： 1.国家油菜改良中心南京分中心

2.江苏省农业科学院经济作物研究所

关键词： 油菜;CRABS CLAW基因;RNA干扰载体

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2015 年 04 期

页码： 737-742

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： CRABS CLAW(CRC)转录因子是YABBY基因家族成员,在植物花器官发育过程中起重要作用。为进一步研究CRC转录因子在调控油菜花器官发育过程中的作用,本研究以甘蓝型油菜品种宁油10号花蕾RNA为材料,通过反转录PCR克隆到1个580 bp长度的CRC基因,并利用p Hurricane中间载体构建CRC基因的反向重复序列表达框,将CRC基因片段以正向的方式连接在1个可剪切的内含子的5'末端,以反向的方式连接到该内含子的3'末端;然后将Ca MV35S启动子序列和CRC基因的反向重复表达框再克隆到植物双元载体p CAMBIAI1390的p UC18多克隆位点,构建了干扰表达载体p A6-CRCi,经过酶切鉴定和测序分析,所构建的载体正确。

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