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固氮施氏假单胞菌电子传递复合体rnf基因簇的功能鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 陆超 1 ; 刘伟 2 ; 黄义 2 ; 杨智敏 2 ; 尚立国 2 ; 张宏扬 2 ; 战嵛华 2 ; 陆伟 2 ; 燕永亮 2 ; 林敏 3 ;

作者机构: 1.中国农业科学院生物技术研究所;浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所;华中农业大学植物科学技术学院

2.;中国农业科学院生物技术研究所;浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所;华中农业大学植物科学技术学院

3.;中国农业科学院生物技术研究所;浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所;华中农业大学植物科学技术学院;

关键词: 施氏假单胞菌A1501;电子传递链rnf;固氮酶活;固氮酶基因nifH

期刊名称: 中国农业科技导报

ISSN: 1008-0864

年卷期: 2018 年 04 期

页码: 44-51

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 能量供应是限制生物固氮效率的重要因素,电子传递复合体是生物固氮过程中能量产生的重要组成部分。基因组分析表明,在联合固氮菌施氏假单胞菌A1501基因组中存在两套编码电子传递复合体rnf,分别为基因簇rnf1和rnf2,其中rnf1位于固氮基因岛上,rnf2基因簇位于核心基因组上。为了明确两套电子传递体在生物固氮过程中的功能,分别构建了rnf1和rnf2基因簇的突变株并测定了相关表型。结果发现,在基本培养基中两个基因簇的突变都不影响菌体生长,可能相互之间存在着功能互补;固氮酶活性测定结果表明,位于固氮基因岛中的rnf1基因簇缺失造成固氮酶活下降80%以上,而rnf2基因簇的缺失对酶活无显著影响。进一步采用启动子-lac Z融合表达策略探究了基因簇rnf1对固氮酶结构基因nif H转录的影响,发现rnf1极性突变株中nif H的启动子转录活性仅为野生型的17.59%,推测rnf1缺失造成了固氮条件下能量产生匮乏,胞内碳氮比失衡,进而造成固氮系统表达受抑制。

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