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应用酵母双杂交系统筛选虾夷扇贝FOXL2的相互作用蛋白

文献类型: 中文期刊

作者: 张阳 1 ; 张玲玲 1 ; 李若佼 1 ; 谢欣冉 1 ; 李仰平 1 ; 李婉茹 1 ; 包振民 1 ;

作者机构: 1.中国海洋大学海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室;海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室青岛海洋科学与技术国家实验室

关键词: FOXL2;虾夷扇贝;酵母双杂交;互作蛋白

期刊名称: 中国海洋大学学报(自然科学版)

ISSN: 1672-5174

年卷期: 2019 年 05 期

页码: 54-59

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: FOXL2是脊椎动物的雌性决定基因,在多种无脊椎动物中也被认为是雌性决定与分化的关键基因,但其在无脊椎动物中的作用机制目前尚不清晰。本文利用Clontech酵母双杂交系统筛查虾夷扇贝FOXL2的相互作用蛋白。研究首先构建诱饵质粒pGBKT7-FOXL2,并检测诱饵蛋白的毒性及自激活活性,结果显示诱饵蛋白对酵母菌株无毒,也无自激活活性。利用该诱饵质粒,本研究从虾夷扇贝酵母双杂交cDNA文库筛选得到17个阳性克隆,测序验证得到12个读码框正确的阳性克隆,它们来自4种蛋白:COP9信号复合体亚基5、钠/钾ATP酶β3、哺乳动物室管膜相关蛋白1和胰脂肪酶相关蛋白2。研究进一步将诱饵质粒与4种蛋白的猎物质粒进行共转化验证,结果均为阳性,表明这4种蛋白与虾夷扇贝FOXL2都可能存在相互作用。本文为研究FOXL2在无脊椎动物性别决定与分化中的作用提供了参考。

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