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柑橘果糖激酶基因的克隆及表达

文献类型: 中文期刊

作者: 秦巧平 1 ; 张上隆 1 ; 陈俊伟 2 ; 谢鸣 2 ; 金勇丰 3 ; 陈昆松 1 ; SYED ASGHAR 4 ;

作者机构: 1.浙江大学农业与生物技术学院园艺系

2.浙江省农业科学院园艺研究所

3.浙江大学生物化学研究所

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关键词: 柑橘;果糖激酶;基因克隆;表达分析;果糖积累

期刊名称: 植物学报

ISSN: 1672-9072

年卷期: 2004 年 012 期

页码: 1408-1415

收录情况: CSCD

摘要: 植物果糖激酶(FRK)在果糖磷酸化中起重要作用.通过PCR技术从温州蜜柑(CITRUS UNSHIU MARC.)基因组中扩增得到编码果糖激酶基因的2个基因组DNA片段,分别命名为CUFRK1、CUFRK2,利用RT-PCR从果实中分离到了与CUFRK1外显子序列一致的CDNA序列,并通过RACE技术分离到这个基因的全长CDNA序列,命名为CUFRK1(GENBANK号:AY561840).CUFRK1与CUFRK2编码氨基酸序列相似性为68%.CUFRK1 CDNA全长为1 459 BP,5''端和3''端的非翻译区分别为167 BP和239 BP,该序列含有一个完整的开放读码框,编码350个氨基酸,蛋白质分子量约为37.5 KD,等电点为5.03,含有2个果糖激酶糖特异结合域及3个ATP结合域,其氨基酸序列与其他植物中已分离的果糖激酶基因相似性在62%~78%.NORTHERN分析显示,CUFRK1(CUFRK1)与CUFRK2在柑橘幼叶、发育初期果实中表达量较高,在果皮和茎中不表达,在花瓣及成熟果实中表达模式有一定差异.酶活性分析表明,果实中的果糖激酶活性随果实的发育而降低,同时,果实中的果糖不断积累,在果实整个发育过程中果糖含量与果糖激酶活性呈极显著负相关.

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