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β-1,3-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的克隆与表达

文献类型: 中文期刊

作者: 陈龙军 1 ; 陈济琛 1 ; 陈亚兰 2 ; 林戎斌 1 ; 林新坚 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院土壤肥料研究所

2.厦门大学化学化工学院

关键词: 毕赤酵母X-33;β-1;3-1;4-葡聚糖酶;诱导

期刊名称: 食品工业科技

ISSN: 1002-0306

年卷期: 2013 年 34 卷 010 期

页码: 170-174

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: β-1,3-1,4-D-葡聚糖酶是一类专一性降解β-1,3-1,4-葡糖苷键中的β-1,4-糖苷键,产生小分子还原糖的水解酶,广泛应用于啤酒工业和饲料工业中.本研究根据毕赤酵母密码子偏好性优化β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因序列,采用PCR法将其插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,经SacI线性化后电击整合入毕赤酵母X-33基因组,构建重组酵母;经菌落PCR验证和摇瓶筛选,获得一株X-33/pPICZαA-bgl,甲醇诱导96h后,酶活力达308.5U/mL,经SDS-PAGE电泳,实际蛋白分子量约为33ku.β-1,3-1,4-D-葡聚糖酶最适反应pH为5.0,最适反应温度为50℃.

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