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金属离子及保护剂对深绿木霉T_(155)产芥子酶的活性影响及芥子酶的分离纯化

文献类型： 中文期刊

作者： 孙迪 1 ; 马艳 2 ; 安霞 1 ; 顾志光 2 ; 王光飞 2 ;

作者机构： 1.南京农业大学

2.江苏省农业科学院农业资源与环境研究所

关键词： 深绿木霉T155;芥子酶;保护剂;电泳;分子量

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2014 年 41 卷 09 期

页码： 1807-1815

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】探求金属离子及保护剂对深绿木霉T155产生的粗芥子酶液活性的影响以及芥子酶的分离纯化方法。【方法】通过添加不同浓度的金属离子及保护剂研究对芥子酶活性的影响并通过细胞破壁、硫酸铵沉淀、透析、Sephadex G-100柱层析、DEAE-52离子交换层析、Sephadex G-200柱层析等方法提取到纯的芥子酶,最后通过电泳检测芥子酶的纯度和分子量。【结果】研究发现Ag+、Zn2+、Pb2+、Mg2+、Hg2+、Fe3+等金属离子在低浓度时对芥子酶均表现为一定的促进作用,但达到一定浓度后则起抑制作用,Ca2+浓度在0.069–17.000 g/L范围内均对酶活性起到促进作用,且促进效果基本与Ca2+浓度成正比;添加1 mmol/L EDTA和3 mmol/L DTT对芥子酶的保护作用最好,4°C保存26 d后芥子酶能够保持85%活性;电泳分析该芥子酶的分子量大约在150 kD左右,并且是一个二聚体。【结论】Ca2+在实验浓度内主要是提高芥子酶活性,而其他金属离子对芥子酶活性主要起抑制作用;EDTA或者EDTA与DTT协同能够较好保持芥子酶活性的稳定性;通过一系列分离纯化步骤得到了纯的二聚体芥子酶,研究结果为挖掘产芥子酶的微生物资源提供了新的途径和思路。

  • 相关文献

[1]一株深绿木霉产芥子酶酶学性质. 殷蒙,马艳,常志州,陈双林. 2012

[2]褐煤提取腐植酸对土壤酶活性和养分的生物利用度的影响. 孙倩,刘建龙,霍连飞,李允聪,李雪,夏礼如,周忠凯,张美娜,李彬. 2020

[3]辐射聚合丙烯酸钠的研究. 陆兆新,魏启建,周云生,谢宗传. 1992

[4]SSR分子标记实验操作注意事项. 戴剑,吴燕. 2011

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