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南方鲇scp3和dmc1基因的克隆、组织分布及体外相互作用

文献类型： 中文期刊

作者： 刘枝华 1 ; 董然然 1 ; 钱佳铭 1 ; 张显波 2 ;

作者机构： 1.贵州大学动物科学学院/特种水产研究所

2.贵州省农业科学院水产研究所

关键词： DNA减数分裂重组酶1(DMC1);联会复合体3(SCP3);南方鲇;基因表达;荧光免疫组化;GST pull-down

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2021 年 29 卷 008 期

页码： 1574-1583

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 联会复合体3(synaptonemal complex 3,SCP3)和DNA减数分裂重组酶1(DNA meiotic recombinase 1,DMC1)是减数分裂过程中的关键因子,南方鲇(Silurus meridionalis)中未见相关报道.本研究利用PCR、荧光免疫组化和Western blot技术,对scp3和dmc1进行克隆、亚细胞定位及组织表达分析,通过GST pull-down实验验证体外相互作用.结果显示,南方鲇scp3(GenBank No.MW075231)和dmc1(GenBank No.MF770581)的CDS为723和1029 bp,分别编码240和342个氨基酸;同源性分析表明,南方鲇SCP3和DMC1与黄颡鱼(Tachysurus fulvidraco)的同源性分别高达89.17%和97%;系统进化分析中,南方鲇SCP3和DMC1与其他鱼类聚成一支,然后与四足类聚成一支;反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)结果显示,在南方鲇的9个组织中,scp3和dmc1仅在卵巢中表达;qRT-PCR结果显示,scp3和dmc1在55 dah(days after hatching)卵巢中的表达量最高,显著高于30和90 dah的表达量;荧光免疫组化的结果显示,SCP3在南方鲇卵母细胞的细胞核和细胞质中有较强的阳性信号,DMC1在卵母细胞的细胞核中有较强的阳性信号;GST pull-down结果显示,SCP3和DMC1存在体外相互作用.本研究结果为深入探讨南方鲇减数分裂过程中SCP3和DMC1作用机制提供基础资料,为人工繁殖南方鲇获得高质量卵子提供参考依据.

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