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羊角槭基因组DNA提取及SRAP-PCR体系优化

文献类型： 中文期刊

作者： 李倩中 1 ; 刘晓宏 2 ; 苏家乐 1 ; 丛郁 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院园艺研究所

2.扬州大学农学院

关键词： 羊角槭;基因组DNA;提取;SRAP;体系优化

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2009 年 25 卷 03 期

页码： 96-99

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用CTAB法、SDS法、偏重亚硫酸钠法提取槭属中羊角槭基因组DNA,通过DNA含量测定、琼脂糖凝胶电泳检测对所提DNA质量进行分析。结果表明,3种提取方法中CTAB法最适合提取羊角槭基因组DNA,所得DNA的质量和纯度较高。以CTAB法提取的DNA为模板进行SRAP扩增反应,对SRAP反应体系的dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度3个主要影响因子进行筛选。获得羊角槭SRAP最优反应体系为:50μl的PCR体系中含有DNA模板100 ng、10×PCR Buffer(不含Mg2+)、Mg2+2.5 mmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L、引物0.5μmol/L、TaqDNA聚合酶1.0 U。

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