文献类型： 中文期刊
作者： 黄丹丹 1 ; 车建美 1 ; 刘波 1 ; 陈庆河 2 ;
作者机构： 1.福建省农业科学院农业生物资源研究所
2.福建省农业科学院植物保护研究所
关键词： 短短芽胞杆菌;几丁质酶基因;克隆;表达;IPTG诱导
期刊名称： 热带作物学报
ISSN： 1000-2561
年卷期： 2014 年 35 卷 09 期
页码： 101-107
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 以短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到几丁质酶基因chiD序列,再将chiD序列连接到pMD18-T克隆载体上,形成重组载体pMD18-T-chiD,转化大肠杆菌DH5ɑ并测序,经过核苷酸和氨基酸序列分析获得几丁质酶基因chiD的序列片段为1 524 bp,编码507个氨基酸,理论蛋白质分子量约54.55 ku,其等电点约为5.77,表明该几丁质酶为酸性几丁质酶。将重组质粒pMD18-T-chiD双酶切后与表达载体pET-28a连接,构建重组表达载体pET28a-chiD,并转入大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达,结果表明:重组蛋白质的分子量约55 ku,与预测的蛋白分子量结果一致。为了提高重组蛋白的表达量,对培养时间、IPTG浓度和温度3个参数进行优化,并将表达产物进行SDS-PAGE分析,最后得出重组载体pET28a-chiD的最佳诱导表达参数分别为8 h、0.5 mmol/L和28℃。这为短短芽胞杆菌来源的几丁质酶的进一步研究奠定了良好基础。
- 相关文献
[1]短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX超氧化物歧化酶基因的克隆及原核表达. 车建美,马桂美,刘波,刘国红,陈倩倩. 2017
[2]副溶血弧菌耐热直接溶血素基因的克隆与表达. 林天龙,李巧苹,福建省动植物进出口检验检疫局,许斌福,杨金先. 2005
[3]茶卷叶蛾寄生真菌球孢白僵菌几丁质酶基因的克隆与序列分析. 王定锋,曾明森,王庆森,刘丰静,吴光远. 2011
[4]内生解淀粉芽胞杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因(bglS)的克隆与表达及酶学特性分析. 邱思鑫,范晓静,胡方平,关雄. 2010
[5]迟钝爱德华菌鞭毛基因克隆表达及其免疫学活性分析. 张晓佩,方勤美,龚晖,林天龙. 2012
[6]橄榄CaERF109和CaABR1基因的克隆及其表达特性分析. 赖瑞联,陈瑾,冯新,王仲,陈义挺,吴如健. 2019
[7]鳗源嗜水气单胞菌β-溶血素基因的克隆及表达. 龚晖,林天龙,俞伏松,董传甫,陈日升,杨金先,陈振海. 2003
[8]橄榄WRKY转录因子的克隆及其在低温胁迫下的表达分析. 赖瑞联,冯新,程春振,陈瑾,陈义挺,吴如健. 2018
[9]番鸭呼肠孤病毒MW9710σC蛋白基因克隆及其在E.coli中表达. 张云,欧阳岁东,刘明,胡奇林,韩周,林锋强. 2005
[10]龙眼花芽ANS基因的克隆与原核表达. 游向荣,许鸿川,梁文裕,陈清西,郑少泉,陈伟. 2010
[11]鳗源嗜水气单胞菌主要外膜蛋白基因克隆及其表达. 欧阳岁东,林天龙,陈孝煊,俞伏松,龚晖,陈红燕,方勤美. 2006
[12]水稻arf1基因3′-UTR片段的克隆和验证. 苏军,管其龙,陈子强,陈在杰. 2019
[13]副猪嗜血杆菌oppA基因的克隆、表达及间接ELISA检测方法的建立. 车勇良,陈如敬,江斌,王隆柏,魏宏,吴学敏,庄向生,周伦江. 2015
[14]短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX对龙眼焦腐病菌的生物防治作用. 车建美,刘国红,陈倩倩,刘波. 2021
[15]短短芽胞杆菌多态性分析及产挥发性物质生防菌株筛选. 车建美,刘国红,陈倩倩,刘丹莹,刘波. 2021
[16]龙眼保鲜功能微生物FJAT-0809-GLX(Brevibacillus brevis)功能成分的分析. 车建美,陈峥,史怀,刘波. 2012
[17]一株短短芽胞杆菌中羟苯乙酯高效液相色谱(HPLC)分析. 车建美,刘波,陈冰冰,史怀,唐建阳. 2015
[18]短短芽胞杆菌代谢物组测定中代谢终止方式的优化. 陈梅春,刘波,朱育菁,陈峥,史怀,刘国红,潘志针. 2012
[19]短短芽胞杆菌FJAT-0809-GXL代谢产物活性物质提取方法的优化. 黄素芳,车建美,刘波,史怀,苏明星,陈峥. 2011
[20]基于顶空-固相微萃取-气质联用的短短芽胞杆菌挥发性抑菌代谢物的鉴定. 陈峥,刘波,陈梅春,潘志针,朱育菁,车建美,史怀,唐建阳. 2014
作者其他论文 更多>>
-
福建省多花黄精根腐病的病原菌鉴定
作者：高文丽;苏海兰;林凤芳;牛雨晴;朱育菁;刘波;程曦;肖荣凤
关键词：多花黄精;根腐病;尖孢镰刀菌;腐皮镰刀菌;藤仓镰刀菌
-
福建省农作物种质资源调查收集与多样性分析
作者：林霜霜;陆佩兰;余文权;张海峰;赵杰樑;陈双龙;翁培铭;车建美;葛慈斌
关键词：福建;农作物;种质资源;调查;收集;多样性
-
不同致病力青枯雷尔氏菌的甲基化敏感扩增多态分析
作者：郑雪芳;舒江霞;林莹;王阶平;陈燕萍;陈梅春;陈峥;刘波
关键词：青枯雷尔氏菌;连续传代培养;DNA甲基化;甲基化敏感扩增多态性
-
微生物发酵床猪舍不同设施条件下空气微生物种群结构特性研究
作者：蓝江林;吴小彬;刘波;陈倩倩;史怀;王阶平
关键词：微生物发酵床;空气微生物;种群多样性
-
复合微生物菌剂对葡萄生长、品质及根际土壤环境的影响
作者：车建美;赖恭梯;李思雨;郭奥琳;陈冰星;陈杏;刘波;赖呈纯
关键词：复合微生物;短短芽孢杆菌;贝莱斯芽孢杆菌;葡萄;品质;土壤
-
微生物发酵床养猪垫料研制番茄育苗基质的效果分析
作者：陈燕萍;郑雪芳;陈梅春;刘波;王阶平
关键词：番茄;微生物发酵床养猪垫料;育苗基质
-
短短芽胞杆菌分支酸合成酶基因BbaroC的鉴定及转录因子调控分析
作者：车建美;赖恭梯;许恒;贺丽媛;李思雨;陈冰星;王阶平;刘波;赖呈纯
关键词：短短芽胞杆菌;分支酸合成酶;氨基酸;莽草酸途径;转录因子
