文献类型： 中文期刊

作者： 钟雪 ¹ ; 齐广勋 ¹ ; 杨静 ¹ ; 邢国杰 ¹ ; 刘剑锋 ² ; 杨向东 ¹ ;

作者机构： 1.吉林省农业科学院农业生物技术研究所

2.吉林师范大学生命科学学院

关键词： 突刺受体结合区RBD;SARS;植物源亚基疫苗;叶绿体表达系统

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2014 年 30 卷 06 期

页码： 920-930

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 叶绿体表达系统为植物源重组药用蛋白和亚基疫苗的生产提供了一个有效的途径。为验证SARS亚基疫苗在叶绿体中表达的可行性,以及为植物源SARS亚基疫苗的生产提供一套高效、低成本的技术平台,本研究将人工优化合成的SARS-CoV突刺蛋白(S蛋白)受体结合区序列RBD与载体分子CTB融合基因导入烟草叶绿体基因组中。PCR和Southern杂交分析表明,外源融合基因已整合到烟草叶绿体基因组中,并获得同质化。Western杂交分析表明,重组融合蛋白CTB-RBD在叶绿体转基因烟草中获得表达,且主要以可溶性单体形式存在。ELISA分析表明,在不同生长阶段、不同生长部位和不同时间点烟草叶片中,重组融合蛋白CTB-RBD的表达水平呈现明显的变化。重组蛋白在成熟叶片中的表达水平最高可以达到10.2%TSP。本研究通过SARS亚基疫苗RBD在烟草叶绿体中的高效表达,有望为植物源SARS亚基疫苗的生产以及SARS血清抗体的检测提供一个有效的技术平台。