文献类型： 中文期刊

作者： 张晨旭 ¹ ; 廖申权 ² ; 戚南山 ² ; 吴彩艳 ² ; 李娟 ² ; 吕敏娜 ² ; 林栩慧 ² ; 吴玄光 ¹ ; 孙铭飞 ² ;

作者机构： 1.华南农业大学兽医学院

2.广东省农业科学院动物卫生研究所

关键词： 柔嫩艾美耳球虫;细胞色素bc1复合物;克隆;原核表达

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2016 年 36 卷 03 期

页码： 448-453

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)细胞色素bc 1复合物(cytochrome bc1,Cytbc1)的生化特性,本研究对其基因进行了克隆和原核表达。根据EupathDB已公布的E.tenella Houghton株Cytbc1基因序列(Contig ID:ETH 00007855)设计特异性引物,运用RT-PCR方法扩增EtCytbc1基因序列,并将其克隆到表达载体pCold43a中,构建重组质粒pCold43a-EtCytbc1,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞E.coli Rosetta(DE3),并进行IPTG诱导表达。结果表明,EtCytbc1的ORF序列(687bp),编码228个氨基酸;重组菌pCold43a-EtCytbc1能成功诱导表达,pCold43a表达部分可溶性蛋白,表达产物纯化后可用于酶生化特性分析。柔嫩艾美耳球虫Cytbc1基因的成功克隆表达为该酶的功能研究奠定了基础。