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苜蓿根腐病菌(Fusarium solani)的LAMP快速检测方法

文献类型: 中文期刊

作者: 兰成忠 1 ; 阮宏春 1 ; 甘林 1 ; 代玉立 1 ; 卢学松 1 ;

作者机构: 1.福建省作物有害生物监测与治理重点实验室/福建省农业科学院植物保护研究所

关键词: 苜蓿;根腐病;茄镰刀菌;TEF-1α基因;LAMP检测

期刊名称: 江西农业学报

ISSN: 1001-8581

年卷期: 2020 年 01 期

页码: 27-32

摘要: 通过比较茄镰刀菌(Fusarium solani)与其近缘种之间的TEF-1α(translation elongation factor-1 alpha)基因序列差异,设计并筛选出一套对茄镰刀菌具有种特异性的LAMP引物,建立了检测苜蓿根腐病菌的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术体系,并进行了特异性和灵敏度验证。该方法在64℃等温条件下进行核酸扩增反应60 min,即可肉眼根据反应液颜色变化判定扩增产物。在特异性实验中,仅茄镰刀菌的DNA在检测后呈绿色的阳性反应,而其它供试菌株的DNA均呈橙色的阴性反应。该方法对目标病菌DNA的最低检测限为10 fg/μL,同时还可检测出苜蓿发病组织中的目标菌,因此,该方法具有快速、准确和灵敏的优点。

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