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紫花苜蓿RAPD反应条件优化

文献类型： 中文期刊

作者： 孙杰 1 ; 杨青川 2 ; 韩国栋 3 ;

作者机构： 1.内蒙古农牧业科学院草原研究所

2.中国农业科学院畜牧研究所

3.内蒙古农业大学生态环境学院

关键词： 苜蓿;RAPD;扩增反应;优化

期刊名称： 畜牧与饲料科学

ISSN： 1672-5190

年卷期： 2010 年 10 卷 Z1 期

页码： 300-303

摘要： 以"中苜一号"、"大西洋"、"渭南"3个苜蓿品种为材料,对RAPD反应条件中的MgCl2浓度、dNTP浓度、随机引物浓度、模板DNA用量、TaqDNA聚合酶用量以及扩增缓冲液浓度分别进行梯度试验。结果表明,该反应体系的体积为25μL,MgCl2浓度为2.7 mmol/L,dNTP浓度为150μmol/L,随机引物浓度为0.192μmol/L,TaqDNA聚合酶用量为每一反应体系2 U,扩增缓冲液浓度(以KCl浓度为指标)为50mmol/L,模板DNA用量为120ng。通过试验建立了一套稳定的RAPD反应体系。该反应体系扩增效果好。

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