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表达鸡新城疫病毒F、HN基因和传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒的构建及其特性研究

文献类型: 中文期刊

作者: 孙惠玲 1 ; 王云峰 2 ; 苗得园 2 ; 张培君 2 ; 智海东 2 ; 徐灵龙 2 ; 王玫 2 ; 童光志 2 ; 汪明 2 ;

作者机构: 1.中国农业大学动物医学院

2.中国农业大学动物医学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 哈尔滨150001,北京市农业科学院畜牧兽医研究所,北京100094,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,北京市农业科学院畜牧兽医研究所,北京市农业科学院畜牧兽医研究所,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,中国农业大学动物医学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150001,中国农业大学动物医学院,,北京100094,哈尔滨150001,北京100094,北京100094,哈尔滨150001,哈尔滨150001,哈尔滨150001,北京100094,北京100094

关键词: 重组鸡痘病毒;新城疫病毒;传染性喉气管炎病毒;F基因;HN基因;gB基因

期刊名称: 生物工程学报

ISSN: 1000-3061

年卷期: 2006 年 22 卷 06 期

页码: 66-74

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用同源重组将新城疫病毒(NDV)的F和HN基因、传染性喉气管炎病毒(ILTV)的gB基因以及报告基因LacZ插入鸡痘病毒(FPV)的017株的复制非必需区,其中NDV的F、HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ是在早晚期启动子LP2EP2的控制下,大肠杆菌报告基因LacZ在晚期启动子P11的控制下。经过10轮蓝斑纯化获得了包含了NDV的F和HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ的重组鸡痘病毒,称为rFPV-F/HN/gB/LacZ。经PCR方法证明rFPV-F/HN/gB/LacZ基因组中含有NDV的F基因、HN基因和ILTVgB基因;间接免疫荧光试验和Western-blot试验表明NDV的F、HN蛋白和ILTVgB蛋白在rFPV-F/HN/gB/LacZ感染的CEF细胞中获得表达。与亲本毒相比,重组病毒在病毒的复制和致鸡胚成纤维细胞的病变方面无显著不同。这证明了在鸡痘病毒载体的一个复制非必需区可以同时插入多个禽类病原的多个外源基因,为制备多价基因工程疫苗奠定了基础。

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