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副鸡禽杆菌LAMP检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 梅晨 1 ; 李淑芳 2 ; 徐玉智 2 ; 张培君 2 ; 龚玉梅 2 ; 王宏俊 3 ;

作者机构： 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所/畜禽疫病防控技术北京市重点实验室

2.;北京市农林科学院畜牧兽医研究所/畜禽疫病防控技术北京市重点实验室

3.;北京市农林科学院畜牧兽医研究所/畜禽疫病防控技术北京市重点实验室;

关键词： 副鸡禽杆菌;16 S rRNA;环介导等温扩增

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2018 年 01 期

页码： 47-51

收录情况： 北大核心

摘要： 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了快速特异的检测副鸡禽杆菌的方法。利用在线引物设计软件Primer Explorer Version 4.0,针对副鸡禽杆菌16SRNA基因序列设计两组LAMP引物,并对副鸡禽杆菌特异性DNA的扩增条件进行优化,评价所建立LAMP的特异性和灵敏性。结果显示,优化后的反应条件为65℃恒温反应60min,内引物1.60pmol/μL、外引物0.20pmol/μL。该LAMP对13株副鸡禽杆菌均发生了扩增反应,而对大肠埃希菌、禽多杀性巴氏杆菌、空肠弯曲杆菌等14株其他病原微生物没有扩增反应;该LAMP最低检出量为0.17pg/反应,敏感性远高于常规PCR的56pg/反应。结果表明,所建立的副鸡禽杆菌LAMP具有快速、高效、方便操作等特点,适用于基层兽医部门进行副鸡禽杆菌的快速检测。

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