文献类型： 中文期刊
作者： 黄志强 1 ; 张学东 1 ; 丁壮 1 ; 张泉鹏 1 ; 宣华 2 ;
作者机构： 1.吉林大学畜牧兽医学院
2.广东省农科院兽医研究所
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;Nsp9基因;克隆序列分析;原核表达
期刊名称： 内蒙古农业大学学报(自然科学版)
ISSN： 1009-3575
年卷期： 2011 年 32 卷 01 期
页码： 15-20
收录情况： 北大核心
摘要： 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ-4株及变异毒株(HB-1、SY0608、HN-HW、HuN4等)的核苷酸序列,利用Primer软件设计合成针对PRRSV Nsp9基因保守区域的特异性引物。用RT-PCR方法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒JL/07/SW株Nsp9基因片段,克隆到pMD18-T载体并测序,基因克隆至表达载体pET-28a(+),得到重组表达载体pET-28a-Nsp9,转化BL21(DE3)细胞。经IPTG诱导,Nsp9蛋白以包涵体形式表达,SDS-PAGE分析表明重组蛋白的分子量约为34.8 kD,表达量占菌体蛋白的40.32%。Western-Blotting结果表明重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别。表达的重组蛋白为进一步制备抗Nsp9单抗及建立区分野毒和灭活毒感染的ELISA方法提供物质基础。
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