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原核表达的PRSV HC-Pro基因同源dsRNA诱导番木瓜抗性的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 杨国峰 1 ; 沈文涛 2 ; 言普 2 ; 黎小瑛 2 ; 周鹏 1 ;

作者机构： 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： 番木瓜环斑病毒;HC-Pro;dsRNA;原核表达;RNA沉默

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2013 年 40 卷 07 期

页码： 1269-1277

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用番木瓜环斑病毒(PRSV)HC-Pro基因3′端824bp区段,通过OZ-LIC法构建了含有PDK内含子的发夹RNA编码结构,并选用pSP73和M-Jm109LacY分别作为宿主载体和宿主菌,构建了高效的同源dsRNA原核表达工程菌M-Jm109LacY/pSP73-RNAi-H824,经IPTG诱导表达的dsRNA不被DNaseI和RNaseA降解,稳定性较好。采用喷洒dsRNA粗制品的方式对番木瓜植株进行保护性处理和治疗性处理,症状观察及ELISA、Real-time RT-PCR分析结果表明,保护性处理能有效诱发对番木瓜环斑病毒的抗性(发病率低,发病时间晚);治疗性处理(植株已接种PRSV 25d)能在处理初期引起番木瓜环斑病毒积累量发生短暂降低。

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