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芒果无机焦磷酸酶基因的克隆及其表达载体构建

文献类型： 中文期刊

作者： 白蓓蓓 1 ; 荆永琳 1 ; 蔡秉宇 1 ; 蓝丽 1 ; 王佳 1 ; 赵志常 1 ;

作者机构： 1.海南大学热带农林学院;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所/农业农村部华南作物基因资源与种质创制重点实验室

关键词： 芒果;PPase;基因克隆;表达载体构建

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2019 年 02 期

页码： 308-313

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 无机焦磷酸酶(inorganic pyrophosphatase,PPase)催化焦磷酸(PPi)水解为2个无机正磷酸(Pi),是蔗糖合成途径中的调控关键节点之一。本研究根据已经报道的PPase基因的序列设计兼并引物,采用3′RACE和5′RACE方法,从贵妃芒果的果实中克隆得到了一个芒果PPase基因,将其命名为MiPPase,其全长cDNA序列为1014 bp,开放阅读框为837bp,编码278个氨基酸,分子量为30.85ku,等电点为4.68。通过系统发育分析发现该基因编码的蛋白与红花烟草具有较近的亲缘关系。为深入探究MiPPase基因在蔗糖代谢过程中的作用,本研究成功构建出pGreenII62-SK-MiPPase基因过量表达载体,为后续研究MiPPase基因在芒果果实蔗糖合成的作用机理提供理论依据。

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