文献类型： 中文期刊
作者： 周勇 1 ; 范玉顶 2 ; 徐进 2 ; 李艳秋 2 ; 肖艺 1 ; 曾令兵 1 ;
作者机构： 1.华中农业大学水产学院
2.中国水产科学研究院长江水产研究所
关键词： 草鱼呼肠孤病毒;VP6基因;植物表达载体;构建
期刊名称： 淡水渔业
ISSN： 1000-6907
年卷期： 2009 年 39 卷 04 期
页码： 42-46
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 以据草鱼呼肠孤病毒(GCRV)VP6蛋白的全基因序列(GeneBank AF403394)为模板,采用RT-PCR构建了草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白基因植物表达载体的构建。结果显示:实验构建的pCR 2.1-VP6重组质粒含有NcoⅠ和BglⅡ酶切位点;pCR 2.1-VP6重组质粒经PCR扩增和测序显示含有1.3 Kbp的草鱼呼肠孤病毒VP6基因读码框片段。将目的片段VP6酶切、克隆到携带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的植物表达载体pCAMBIA1302中,再经酶切、PCR扩增和序列测定显示,pCAMBIA1302-VP6含有1.3 Kbp的草鱼呼肠孤病毒VP6基因片段,说明已插入植物表达载体pCAMBIA1302绿色荧光蛋白基因前,成功构建了融合表达草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白和绿色荧光蛋白的植物表达载体pCAMBIA1302-VP6。
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