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湖羊Sp1基因CDS区克隆及其对颗粒细胞增殖和凋亡的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 姚一龙 1 ; 李隐侠; 安外尔·热合曼; 张俊; 孟春花; 王慧利; 钱勇; 曹少先;

作者机构： 1.江苏省农业科学院畜牧研究所

关键词： Sp1基因;过表达载体构建;KGN-细胞;细胞增殖;细胞凋亡

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2017 年 11 期

页码： 2098-2106

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在探讨湖羊Sp1基因序列特征及其对颗粒细胞增殖及凋亡的影响。采用克隆、测序获得湖羊Sp1基因CDS区并用生物信息学方法分析其序列特征;NJ方法构建基于Sp1氨基酸序列的系统进化树;RT-PCR方法检测Sp1基因湖羊组织表达谱;克隆方法构建湖羊Sp1过表达载体;试剂盒检测Caspase-3活性和CCK-8值;利用流式细胞术检测人卵巢颗粒细胞(KGN)凋亡率。结果表明,湖羊Sp1CDS区长2 340bp,编码779个氨基酸残基,与人的核苷酸序列和氨基酸序列的同源性分别为94.28%和95.75%;湖羊与牛的亲缘关系最近;Sp1基因在湖羊卵巢、卵泡等组织中广泛表达。本研究成功构建了湖羊Sp1过表达载体并转染人卵巢颗粒细胞(KGN);试验组Caspase-3活性显著高于对照组(P<0.05),CCK-8值检测结果相反。表明过表达Sp1基因抑制KGN-细胞增殖(P<0.05)、促进KGN-细胞凋亡(P<0.05)。Sp1基因在哺乳动物中高度保守,湖羊Sp1基因可抑制人卵巢颗粒细胞(KGN)增殖、诱导其凋亡。

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