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枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 顾林平 1 ; 张冰 1 ; 费艳 1 ; 王化坤 1 ; 王鹏凯 1 ;

作者机构： 1.江苏省苏州市吴中区金庭镇农林服务站;江苏省太湖常绿果树技术推广中心;江苏省农业种质资源保护与利用平台;苏州农业职业技术学院

关键词： 枇杷;iPBS分子标记;体系优化;引物筛选

期刊名称： 中国南方果树

ISSN： 1007-1431

年卷期： 2019 年 01 期

页码： 41-46

收录情况： 北大核心

摘要： 以枇杷的DNA为模板进行iPBS-PCR扩增,采用预备试验中效果较好的iPBS分子标记引物2241,对枇杷iPBS-PCR反应体系中的dNTP、Mg2+、引物、模板用量进行优化。根据检测结果确定枇杷iPBS-PCR使用10×Taq buffer 2μL,25mM Mg2+1.6μL,2.5mM dNTP 1.6μL,10μmol/L Primer 1μL,5U/μL Taq酶0.2μL,模板DNA 5ng的20μL反应体系。反应程序中的退火温度可以参考iPBS引物理论Tm值。对33条iPBS引物扩增测试的结果显示在该反应体系下可以筛选到谱带清晰、多态性好的引物22条,可用于枇杷的分子标记分析。

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