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玉米大斑病菌腺苷酸环化酶基因的克隆与功能分析

文献类型: 中文期刊

作者: 申珅 1 ; 王晶晶 1 ; 佟亚萌 1 ; 李坡 2 ; 郝志敏 1 ; 董金皋 1 ;

作者机构: 1.河北农业大学生命科学学院/真菌毒素与植物分子病理学实验室

2.河北省农林科学院植物保护研究所

关键词: 玉米大斑病菌;腺苷酸环化酶;致病性;渗透胁迫

期刊名称: 中国农业科学

ISSN: 0578-1752

年卷期: 2013 年 46 卷 05 期

页码: 881-888

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】获得玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)cAMP信号转导途径中腺苷酸环化酶基因(StAC),利用基因敲除技术明确其在病菌致病过程中的功能。【方法】应用简并引物PCR和Genome Walking技术克隆玉米大斑病菌腺苷酸环化酶基因(StAC)DNA全长序列,并对该基因进行生物信息学分析;利用Southern blotting验证基因拷贝数;通过基因敲除技术创制StAC的缺失突变体,研究玉米大斑病菌cAMP信号转导途径中StAC的功能。【结果】StAC的DNA全长为6 816 bp,由5个外显子和4个内含子组成;ORF为6 018 bp,编码2 005个氨基酸,同源序列比对发现StAC与小麦黄斑叶枯病菌(Pyrenophora tritici-repentis)的AC基因有96%的同源性;Southern blotting证明StAC在玉米大斑病菌基因组中以单拷贝形式存在;基因功能分析表明,StAC缺失突变菌株Δstac气生菌丝灰白色,不产生分生孢子,毒素活性明显减弱,致病力下降,且在渗透胁迫条件下,菌株的抗逆能力增强,色素合成发生了改变。【结论】StAC主要调控玉米大斑病菌的产孢、致病性、高渗胁迫反应、毒素活性及色素的合成代谢。

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